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生物安全柜的正确操作

2017-11-15 点击数:1048

生物安全柜主要用于各种微生物,特别是有害微生物的操作和基因工程操作根本目的是保护工作人员健康和柜外环境安全。生物安全柜正确操作目的是为维持生物安全柜对柜的正常运行,和操作人员的生命安全。文章就生物安全柜吸附垫、回收容器及柜内实验器材和材料的取出、瓶盖、消毒火焰、溢出处理。


生物安全柜正常运行,必须定期检查高效空气过滤器是否有堵塞、泄漏等情况,风量及其平衡情况,以及联锁控制、报警装置的完好性。为对柜内的污染充分稀释,并保持下次正常运行,操作完毕后至少应空转10min。


基于操作生物安全柜安全目的,前部开口高度不能超过额定值,不能随意改变其面积和形状。应特别注意使手、材料、器具等通过前部开口部位的次数最少,在操作开始前就把必要的器具和材料放到适当的位置上。控制平行于开口部位的室内风速很重要,如果超过开口部位平均风速将影响生物安全柜回风能力,使前窗开口处的隔离效果很快下降,手背能感觉的风速通常已有0.5m/s,而人步行导致的风速很容易达到1m/s,所以应特别控制人员走动引起的干扰气流。


生物安全柜正确操作--吸附垫

在操作台面放一层贴有吸附材料的塑料薄膜,每日更换,可使操作台面的污染减少到最低限度。


生物安全柜正确操作--回收容器

在安全柜内应配置回收污染物质的容器。其中吸球(即吸管)用的容器2-3个,污染的玻璃器具和废弃物等用的容器至少4-5个。容器中必须盛足消毒液,如:有效含量为500ppm以上的雅妍酸钠,把污染物质完全浸没。这些回收容器至少每天操作完毕后盖好以防污染。再用时应重新清洗容器或者用新的容器。


生物安全柜正确操作--柜内实验器材和材料的取出

凡废弃的污染性材料、使用过的包装材料、容器、纸张等废弃物统统收装好或者经高压灭菌器灭菌后拿到缓冲区。

在实验中或完毕后,必须从生物安全柜内取出非活灭的病原体时,应装好放在药液槽中,使容器外侧被消毒后取出,消毒液种类因病原体不同而异.

瓶盖
在生物安全柜内使用的瓶子不用橡胶塞,而应使用螺旋盖,开启时可减少气溶胶的发生。
消毒火焰
用火焰消毒是古典的微生物学方法,但是会产生气溶胶,并使柜内气流紊乱,应尽量不使用,而可以用最近研制成功的小型电加热器、无焰管口加热器进行消毒。在不得已使用火焰消毒时,美国建议在安全柜内用手动灯头,日本建议用脚踏式灯头,首先用小火点燃,然后在脚下将脚蹬开关一踏,主要火焰就被点着。脚蹬开关一旦停止踏时,主要火焰立即熄灭,并且采用不开通风机则不点火的联锁气闸方式,因而也比较安全。
溢出处理
    GB194892007《实验室生物安全通用要求》对生物安全柜内溢出时的处理给出了方法:
滴状溢出或体积不足1 mL 的,可简单地用消毒剂擦洗。
大量溢出,则要做特殊的处理
1) 使生物安全柜保持开启状态。
2) 在溢出物上覆盖浸有消毒剂的吸水材料,作用大约10分钟以发挥消毒作用。
3) 在安全柜内对污染的手套消毒后,脱下手套。如果衣服已经污染,也要先脱下消毒。穿戴干净的手套和衣服作如下进一步的清洁工作。
4) 用消毒剂喷洒或擦拭安全柜内壁、工作表面以及前视窗的内侧。作用20 min后,擦干消毒剂并将擦拭物置于生物危害袋中。
5) 如果溢出情况需要浸泡接液槽,则不得现场清理接液槽。应报告实验室主管后采用适当的气体消毒方式。
6)将所有清理用物品以及防护服进行高压消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮肤。
7) 立即通知实验室主管。如果溢出物流入安全柜内,可能需要对安全柜进行更为广泛的消毒处理。
● 工作结束后的要求
将安全柜继续运行至少3min来完成“净化”过程。
将柜内物品移出前,应使用有效的消毒剂擦拭
每天实验结束后,对生物安全柜的内壁和台面进行擦拭。
等待5分钟后,关闭前窗,关灯,关风机,紫外灯照射30分钟。

生物安全柜 

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